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    炎症检验指标血清淀粉样蛋白A(serumamyloidA,SAA)解析(二)

    武汉华美生物工程有限公司2018年9月26日 13:20 点击:251

    由蒋瑾瑾教授等提出的“SAA、CRP、WBC新三大常规“ 组合检测新概念已得了普遍的应用和认可,这有利于提高诊断正确率、?#34892;?#37492;别细菌病毒感染、让抗生素不再滥用。新三大常规组合检测的应用,首先应得益于高科技的贡献,血清淀粉样蛋白A (SAA)国产试剂的问世为“新三大常规”提供了主力武器,使临床诊断证据更充分。但开始应用时常会遇到“测了CRP为什么要加SAA试验”的常见认识误区。本文重点对“新三大常规”组合检测中的SAA新试验的临?#24067;?#20540;和实用意义作分析讨论。

    一、鉴别细菌病毒感染已经有了CRP为什么还要用SAA?
    1、SAA例入“新三大常规”检测的首要原因在于新试验的先进性和诊断价值的特殊性。这同有了白细胞计数后为什么还要用CRP;用了常规CRP后还要用hsCRP是一样的道理。SAA是肝脏中合成的急性时相蛋白,健?#31561;?#22312;10mg/L以下,比CRP升高时间更早;敏?#34892;?#26356;高,康复?#25351;词?#19979;降更快;SAA指标比CRP更为灵敏,它在病毒和细菌感染后约8h后开始升高?#39029;?#36807;参考范围上限时间早于高于CRP,在轻微感染,微弱的炎症刺激SAA较CRP更灵敏可提供更好的鉴别价值。

    比较

    细菌感染

    病毒感染

    SAA

    比CRP升高更早、下降更快、幅度更大

    明显增高

    CRP

    明显增高

    不增高或略增高

    2、 SAA临床应用范围更广?#21512;?#33740;病毒感染、心血管疾病、肿瘤、移植排异、结核、淀粉样病变、类风关等多种疾病?#26412;?#22686;高,可作为辅助诊断的新指标。以细菌和病毒感染鉴别诊断的应用为例:SAA在细菌和病毒感染的早期均可升高,而CRP在病毒感染时一般不增高的特点,因此两者同时检测可对早期细菌和病毒感染的鉴别诊断提供有力的数据。例如两者均增高细菌感染的趋向性较大?#27426;鳦RP正常SAA明显增高者,结合临床对病毒性感染的趋向性诊断又多了一份依据。例如因物理因素所致的发热和病毒感染引起的感冒,两个病例同测WBC、CRP,都可能是正常结果,因而不能鉴别诊断,但加测SAA指标后,SAA增高者结合临床症状提示病毒性感染可能性的证据更充分;特别在婴幼儿感染性疾病的早期,细菌和病毒感染确是很难鉴别,而SAA和CRP的联合检测比单独测CRP更有独特的意义,更有利于小儿感染性疾病的早期诊断,对细菌和病毒感染的初筛和鉴别诊断又多了一份依据,更能体现单项指标不能反映的增值意义,减少不必要的抗生素的应用,有利于病人的早日康复和预?#28389;?#33647;细菌形成。SAA联合CRP检测既可作为病毒感染的辅助诊断又可动态观察病情和疗效并能?#34892;?#25351;?#21058;?#24202;用药。因此被人们誉为病毒感染辅助诊断的王牌试验。
    3、SAA除感染性疾病外对多种疾病均有很好的诊断意义:如心血管疾病、肿瘤、移植排异、结核、淀粉样病变、类风关等疾病?#26412;?#22686;高,都可作为辅助诊断的新指标。以冠心病风险性的评估预测为例,原用高敏CRP(hsCRP) 以>3mg/L评估为高危险性,由于单一hsCRP虽有较高敏?#34892;?#20294;特异性不高,使冠心病风险性评估预测的正确性受影响,SAA+hsCRP双重指标应用于冠心病风险性评估的趋向性和预测的正确性将成倍提高。
    二、“新三大常规”组合检测的优势互补和单一指标的局限性
    发挥多项目组合检测的优势互补达到正确诊断,这是“新三大常规?#36125;?#26032;概念缘起的另一重要原因。
      1、“新三大常规”可以发挥多项目组合的优势互补达到正确诊断。以细菌和病毒细菌感染为例,理论上典型的实验数据前者应为SAA、CRP、WBC三项均增高?#27426;?#30149;毒感染时只有SAA一项增高;但是由于病人个体差异和临床情况的多样性导致检验结果反映不典型,例如细菌感染者只有SAA、CRP二项增高WBC正常,或是只有WBC一项增高而SAA或CRP正常,这些非典型的检验结果临床常会遇到,如果只是单一指标也很?#38597;?#26029;解释,而多指标的互补可取长补短综合分析,如上述WBC增高而SAA、CRP正常,结合临床亦可作为细菌感染趋向的诊断。?#31185;?#21407;因我们发现SAA、CRP在肝脏合成,某些肝功能不好的细菌感染病人结果增高就不明显?#27426;?#21407;为低白细胞者如3、0×109/L上升到9.0×109/L虽然还在正常范围但作为个体来讲已增高了3倍,?#24471;?#20165;?#38236;?#19968;指标可能会引起误导, 这就是“SAA、CRP、WBC新三大常规”组合检测创新概念数据互补的重要贡献和必要性。
    2、SAA新试验作为“新三大常规” 骨干成员,一滴血2-3分钟POCT?#35789;?#25253;告更利于病人的及时诊断治疗,目前已成临床应用频度最高的化验。特别是当检验结果出现不典型表?#36136;?#22810;项数据的互补对诊断更有帮助。目?#30333;?#21512;检测新概念相继在各地应用,“新三大常规”给实验诊断又添一慧眼,鉴别细菌病毒感染让抗生素不再滥用。

    SAA1单克隆抗体

    科赛格最新推出一批高质量的抗人SAA1单克隆抗体,能够用于双抗?#34892;?#27861;免疫检测。利用我公司胶体金检测?#25945;?#23545;自产SAA1抗体进行检测范围的初步评价,并且将所推荐的抗体对用于检测血清样本,检测结果和诊断试剂盒测试结果一致。


    性质

    参数

    靶标?#36136;?/p>

    人类

    宿主

    Balb/c小鼠

    融合细胞

    Sp2/0

    免疫原

    人血清淀粉样蛋白A1

    纯化方式,纯度

    Protein G亲和纯化,>90%(SDS-PAGE)

    保存缓冲液

    磷酸?#20301;?#20914;液(pH 7.4)

    应用范围

    胶体金,胶乳免疫比浊,免疫荧光层析等

    货号

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN

    CSB-DA118BmN


    校准曲线

    A.胶体金?#25945;?/strong>

    以CSB-DA118BmN作为捕获抗体,划线至NC膜,CSB-DA118HmN作为标记抗体,建立SAA1胶体金检测体系。用蛋白稀释液将人血清淀粉样蛋白A1进行稀释,制备出0、0.5、2、10、20、50、100和200 mg/L浓度的血清淀粉样蛋白作为校准品。如图1所示,随着SAA1蛋白浓度的增加,C线颜色逐渐变?#24120;琓线颜色逐渐?#30001;睿?#30001;此?#24471;?#33014;体金检测信号和SAA1浓度成正比例。

     图1.胶体金?#25945;?#23545;不同浓度SAA1的定性检测


    B.胶乳比浊?#25945;?/strong>

    将两组单抗对混合包被于胶乳颗粒,制备成胶乳试剂,检测0~250 mg/L的SAA1校准品,建立校准品浓度与反应吸光值的对应关系,进行线性回归拟合,适合胶乳比浊的抗体

    MAb pair A:CSB-DA118BmN- CSB-DA118BmN

    MAb pair B:CSB-DA118BmN- CSB-DA118BmN


    图2胶乳比浊?#25945;?#26816;测SAA1蛋白的校准曲线

    临床检测

    A.胶体金?#25945;?/strong>

    为验证抗体适用于临床检测,利用?#28814;?#20876;的诊断试剂盒对血清样本进行定量检测,然后在胶体金?#25945;?#21033;用自制抗体对CSB-DA118BmN-CSB-DA118BmN对28份血清样本(样本稀释80倍)进行定性检测,检测结果如图3,本公司自产胶体金试?#25945;?#23450;性检测T线颜色深浅和IVD诊断试剂盒测试结果基本一致,证明自产SAA1基本满足临床检测要求。


    图3.科赛格SAA1胶体金试?#25945;?#23545;临床血清样本的检测


    B.胶乳增强免疫比浊?#25945;?/strong>

    将两组单抗分别制备成胶乳增强免疫比浊试剂,然后测60份赋值血清,检测结果比对如下图4所示,两对抗体应用于胶乳免疫比浊?#25945;?#19982;IVD诊断试剂盒检测值相关性大于0.95,表明本公司生产的SAA单克隆抗体可?#26376;?#36275;临床检测需求。

    图4. SAA1单抗应用于胶乳免疫比浊?#25945;?#26816;测血清样本


    SAA1蛋白

    科赛格同时提供高质量的SAA1蛋白,货号为CSB-DP118B。可用于免疫测试的校准品、免疫印迹等方面。


    点击申领试用装


    (来源: 武汉华美生物工程有限公司


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