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    细胞培养上清的处理方法是不一样

    上海一研生物科技有限公司2019年6月4日 2:02 点击:158

          通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的*步。

    细胞培养上清

    取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

    4、 细胞裂解液

    1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

    2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。

    3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临?#20204;?#21152;入蛋白酶?#31181;?#21058;)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

    4) 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷?#24120;?#20877;放室温解冻样品,反复冻融?#22797;危?#20351;细胞充分裂解。也可将样?#26041;?#34892;超声破碎,以达到裂解的目的。

    5) 4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

    5、组织匀浆液

    1) 将组织样本用PBS (0.01 [锚点] [锚点] M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。

    2) 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆?#37238;?#20805;分

    3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临?#20204;?#21152;入蛋白酶?#31181;?#21058;)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要?#23454;?#35843;整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)

    4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

    6、 尿液、唾液等其他液体生物样本


    (来源: 上海一研生物科技有限公司


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