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    ELISA试剂盒供应商原理与制备方法是什么

    上海一研生物科技有限公司2018年9月19日 10:03 点击:167

          ELISA试剂盒供应商作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血,鼠等小动物取血可参阅有关资料。剪去耳缘的毛,用少许二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管扩张、充血。用手轻拉耳尖,?#32536;?#38754;剃须刀或尖的手术刀片,快速切开动脉或静脉,血液即流出,每次可收集30~40ml 。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,?#37096;?#20197;在免疫前取需要量佐剂置乳钵中?#24515;ィ?#24179;均后再边磨边滴加入等容积抗原?#28023;?#20854;中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加完后再继承?#24515;?#25104;乳剂,滴于冰水上5~10min内完全不扩散为止。交叉反应?#23454;停?#34920;示抗血清的特异性好,反之则特异性差。

          收集的血液置于室温下1h左右,凝固后,置4℃下,过夜(切勿冰?#24120;?#26512;出血清,离心,4000rpm,10min。取兔血有两种方法,一是耳缘静脉或耳动脉放血,二是颈动脉入血,?#37096;?#24515;脏采血。加强免疫时用不完全佐剂,首次免疫时皮下打针百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必打针百日咳疫苗。特异性好就是抗血清的识别能力强,当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。抗原剂量,首次剂量为300~500μg,加强免疫的剂量约为首次剂量为1/4左右。 C冰箱保留。检查合格后即以其中一打针器作打针用。佐剂除?#25628;?#38271;抗原在体内的存留时间,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激网状内皮?#20302;常?#20351;介入免疫反应的免疫活性细胞增多,促进T细胞与B细胞的相互作用,从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满足时为止。


    (来源: 上海一研生物科技有限公司


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