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    光度仪器的校正方法

    互联网2010年5月7日 9:35 点击:2344

    ① 波长的校正 仪器长期使用或移动后,波长读数可能产生误差。用已知光谱的标准样品测定吸收光谱,与标准光谱的吸收峰波长值对照,求出波长的误差,然后进行相应的调整。一般可见分光光度计的波长允许误差为±?#24120;睿懟?br /> 紫外光区校正的方法是:在干净的石英吸收池中滴入一滴苯,盖上吸收池盖,待苯挥发充满吸收池空间后,测定苯蒸气的紫外吸收光谱,然后与苯标准紫外吸收光谱对比,必要时,调整
    波长。
    ② 吸光度的校正 用0.0?#25285;恚錚歟?氢氧化钾溶液作溶剂配制0.0?#24120;埃常紓?#30340;碱性重铬酸钾溶液 (分析纯,?#20445;保啊?干燥 ?#24120;瑁?#22312;?#29627;怠?#26102;用?#20445;睿?谱带的宽度,以0.0?#25285;恚錚歟?#27682;氧化钾溶液为参?#28909;?#28082;,测定其在不同波长下的吸光度或透光率。测定的值与数据比较以确定吸光度的误差。
    ③ 杂散光的校正 单色光中含有一定的杂散光。杂散光影响摩尔吸光系数与吸光度间的直线关系。杂散光的校正是选用在某一波长处透光率为零的滤光片,将其放入样品光?#20998;校?#27979;定此波长处的透光度,记为S,S为校正值。实际透光度等于样品测得的表观透光度减去S值。
    ④ 吸收池的校正 吸收池的方向性和配套性,吸收池的光程长度以及光学特性的差异都将给测量带来误差。
    a 吸收池的方向性和配套性 吸收池无方向标示时,?#28909;?#23450;方向,并作好标记。同一组吸收池相互间的差异应小于测定误差。
    吸收池不配套也往往引起测量误差,必须进行比对,数只吸收池应标上不同的符号,固定一为参比,装入相同浓度的溶液,各吸收池读数误差不应大于0.00?#24120;?#21542;则需对差值进行校正。
    b 吸收池的校正 将纯净的蒸馏水注入吸收池?#26657;?#20197;其中吸收最小的吸收池的吸光度为零,测定其他吸收池的吸光度。测定待测样品时,将其吸光度减去吸收池的吸光度。
    ⑤ 灵敏度校正 配制0.00?#20445;?K?#29627;茫潁玻希?溶液,用?#20445;悖?吸收池,蒸馏水作参比,于440nm 处测得的吸光度应大于0.0?#20445;埃?#33509;小于0.0?#20445;?#26102;,应检查或更换光电管或光源等。
    ⑥ 稳定度检验仪器预热后,分别调节透光率为0% 和?#20445;埃埃ィ?#22312;规定的时间内观察其变化是否符合要求。
    (?#29627;?#32500;护
    ① 光源 光源的寿命是有限的。为延长其使用期限,要尽量减少开关次数,在短时间的工作间隔内可以不关灯。?#23637;?#38381;的光源仪器连续使用时间不应超过?#24120;琛?#33509;需长时间使用,最好间
    歇?#24120;埃恚椋睢?#26356;换光源灯时,不要用手接触灯的窗口,以免在窗口玻璃上留下痕迹。对紫外灯不能直视,调整其位置时要戴防紫外线的保护眼镜。
    ② 单色器 单色器不可随意拆动。注意定期更换内装的干燥剂。选择波长和狭缝宽度时要按规定方向平稳地转动,不可用力过猛。
    ③ 吸收池 要小心保护吸收池的透光面,不得用手接触吸收池的透光面,只能用镜?#20998;?#25110;脱脂棉轻轻擦拭,避免硬的物品划伤透光面。已匹配好的吸收池不能用炉子或火焰干燥。不同仪器的吸收池不要混用,以免引起测定误差。
    用后吸收池要及时清洗。有色物质污染时,用?#24120;恚錚歟?#30340;盐酸和等体积的乙醇混合液洗涤吸收池,再用自来水、蒸馏水冲洗。
    ④ 检测器
    a 检测器室要保证干燥。
    b光电元件必须避免不必要的曝光,在测定过程中要随时关闭光闸。
    c 光电池在不用时要遮断光源并短路。
    d 整台仪器避免在日光下照射。
    4 定量分析方法
    样品组成简单的定量方法常用工作曲线法、?#33519;?#27604;较法、标准加入法。对于复杂的或高含量的样品分析,可以用示差光度法、吸光度加和法 (包括等吸收波长法)以及导数光谱法等。
    (?#20445;?#31034;差光度法 在高吸光度样品分析?#26657;?#21033;用示差光度法用
    一个浓度比试样溶液浓度cx 稍低的标准溶液cs 为参比液。根据光的吸收定律,?#26657;?br /> Ax=abcx
    As=abcs
    两式相减得:
    Ax-As=ab(cx-cs)
    ΔA=abΔc (?#20445;藹玻叮?br /> 由式 (?#20445;藹玻叮?#21487;知,当液层厚度b一定时,试样溶液和参?#28909;?#28082;的吸光度之差与其浓度之差成正比,这是示差光度法的定量依据。示差光度法适用于常量组分的定量分析。

    (来源: 互联网 )


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