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    液相色谱法在生化方面的实际应用

    来宝网2007年11月1日 13:29 点击:1163

    主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相应的肽和蛋白质。

      ①在细胞核中有种类繁多的甙及核甙酸,可用不同的检测器或酶转移检测器或利用酶反应进行定性测定。用离子交换柱和缓冲游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的缓冲水溶液的梯度淋洗法均能得到满意的结果。

      ②分析核酸近年来有关分析核酸的研究很多,主要是分离RNA、DNA及碎片。现在使用硅烷化的硅藻土或长碳链季?#36153;?#28034;渍=在上面制成系列填充柱。已能分离t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有没的缓冲液淋洗,还可利用此?#38469;?#20570;RNA碎片的序列分离制备工具,对生物研?#31185;?#20102;重要的作用。

      ③氨基酸、肽、蛋白质的分析,氨基酸分析主要是制成荧光衍生物或酰氯的衍生物,?#32531;?#27979;定其序列。近来也可用高效液相色谱的柱后衍生物法测定其序列。操作简便、速度快、深受欢迎。用四烷基氯化胺肽形成离子对或高效凝胶色谱测定蛋白质,其分离效果也很好。

      ④酶的分析,酶是在血清及其他生理样?#20998;?#24120;有的反应产物,化学分析法操作不便,?#33258;?#25104;误差,用色谱?#38469;?#20998;析,具有操作简便、快速、准确的特点。如测定碱性或酸性磷酸酶的含量,测定反应产物中腺甙脱 胺酶的含量等,目前对酶用色谱法分离分析的研究工作已开?#36141;?#22810;。

      ⑤糖的分析,糖的分析是其它方法较难完成的。如把糖与硼酸缓冲液预选混合,使生成糖-硼酸络合离子,再进行分离。可把蔗乳糖、阿芦糖、果糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等几十种,全部分开。也可用胺基柱分离各种天然产物中伯糖的各绷分。
    (来源: 来宝网 )


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