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    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置首页>实验试剂制品>核酸纯化>DNA凝胶回收纯化> 琼脂糖凝胶小量回收试剂盒(250preps)

    商品编号:54037
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    琼脂糖凝胶小量回收试剂盒(250preps)

    价    格:1490.00

    产    地:美国更新时间:2016/12/19 11:00:40

    品    牌:Biomiga型    号:DC3511-02

    状    态:正常点击量:1747

    15068328216
    联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!

    上海妙骏生物科技有限公司

    联 系 人:言国英

    电     话:021-54461558

    传     真:021-54461657

    等     级: (第 10年)

    性     质:生产型,

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    产品说明:

    本试剂盒可以简单、快速、高效的从琼脂糖凝胶或PCR反应产物中回收DNA片段,有效纯化长度在100bp-20kb的片段,回收率高达80-90%。

    保存条件:

    Buffer GC应避光保存,其他组分室温保存。

    使用前请注意:
    ?
    ? 使用前请分别在DNA Wash Buffer中加入8 mL (DC3511/DC3514-00) 或者60 mL(DC3511/DC3514-01) 或者96 mL (DC3511/DC3514-02) 或者60 mL (DC3511/DC3514-03) 100% 乙醇。
    ? 溶解100 mg的琼脂糖凝胶,约需要100 μL Buffer GC。
    ? 溶胶液GC 在?#31995;?#28201;度下易沉淀,若温度?#31995;停?#20986;现沉淀,使用前请在37 oC加热几分钟,至沉淀溶解后再使用。
    ? 本试剂盒所有操作步骤均在室温下进?#23567;?/strong>
    ?
    用户?#21592;?#26448;料:
    ?
    ? 100% 乙醇
    ? 台面离心机和1.5 mL 微型离心管
    ??55-60 oC 水浴(胶回收时用)
    ??真空装置(真空步骤时用)
    ??小于200 bp的片段的可加异丙醇。
    ?
    PCR产物纯化/胶回收离心法操作步骤:
    ?
    1. PCR产物纯化:在1倍体积的PCR反应物中加入2倍体积的 Buffer GC,?#34892;?#20805;分混匀。对小于200 bp的PCR产物,加入5倍体积的Buffer GC。
    ?
    胶回收:将含DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转至1.5 mL离心管中,再加入1倍体积的Buffer GC (100 mg的凝胶加入100 μL Buffer GC)。在55-60 oC下培育8分钟左右,且每隔2分种轻弹试管底部,直至胶溶解完全,放置使其冷却至室温。
    ?
    建议:?
    ?为取得最好的实验结果,请使用新鲜配制的电泳缓冲液制胶和电泳。
    ?切胶时,尽量缩短在紫外灯下照射的时间,以减少紫外对DNA的损伤,并尽量切除不含DNA的凝胶。
    ?若DNA片段小于200 bp,请加入1体积的异丙醇。
    ?
    2.?转移700 μL DNA/Buffer GC 混合溶液至离心柱中,室温下,13,000 x g下离心1分种,弃废?#28023;?#23558;离心柱放回收集管?#23567;?#37325;?#21019;?#27493;使剩余的溶?#21644;?#36807;柱子。
    ?
    3.?加入300 μL of Buffer GC到离心柱中,室温下13,000 x g离心30-60 秒,弃废液。
    ?
    4.?加入650 μL DNA Wash Buffer (确保已将乙醇按说明书要求加入DNA Wash Buffer中),室温下在13,000 x g下离心30秒,弃废液。重复步骤4。
    ?
    4.?13,000 x g开盖再次离心3分钟,以去除柱中残余的乙醇。
    注意:此步操作对DNA的产率多少极为关键。
    ?
    5.?将柱子放入干净的1.5 mL试管中,向柱中加入在60oC 下预热的30-50 μL Elution Buffer或ddH2O。在室温下放置1分钟。13,000 x g 离心1分种以洗脱DNA。将洗脱液重新上柱,再次离心洗脱。
    ?
    建议: 将洗脱缓冲液预热到65 oC,加洗脱液后将柱子整?#37995;?#32946;5分钟后再离心洗脱可以增加DNA回收效率。
    对大于8kb的片段,加洗脱液后将柱子整?#37995;?#32946;15-30分钟可以提高回收效率。
    ?
    PCR产物纯化/胶回收真空/离心法操作步骤
    ?
    ?
    1.?将含DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转至1.5 mL离心管中,再加入1倍体积的Buffer GC(100 mg的凝胶加入100 μL Buffer GC)。在55-60oC下培育8分钟左右,且每隔2分种轻弹试管底部,直至胶溶解完全,放置使其冷却至室温。
    ?
    2.?准备真空装置,将柱子与歧管连接。
    ?
    3.?将 DNA/Buffer GC 混合溶液转移至离心柱。
    ?
    4.?打开真空装置,溶液流下。
    ?
    5.?加入650 μL的DNA Wash Buffer漂洗离心柱。
    ?
    6.?重复步骤5。再真空抽2分种。
    ?
    7.?将柱子放入收集管,开盖在最高速离心2分种以除去乙醇。
    ?
    8.?将柱子放入干净的1.5 mL试管中,向柱中加入30-50 μL Elution Buffer或ddH2O。在室温下放置1分种。13,000 x g 离心1分种以洗脱DNA。




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