• <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
    来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置首页>实验试剂制品>核酸纯化>质粒提取纯化> 快速过滤法质粒超大量提取试剂盒(10preps)

    商品编号:53843
    分享

    快速过滤法质粒超大量提取试剂盒(10preps)

    价    格:2380.00

    产    地:美国更新时间:2016/12/19 11:00:40

    品    牌:Biomiga型    号:PD1611-02

    状    态:正常点击量:727

    15068328216
    联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!

    上海妙骏生物科技有限公司

    联 系 人:言国英

    电     话:021-54461558

    传     真:021-54461657

    等     级: (第 10年)

    性     质:生产型,

    联系我时请说在来宝网上看到的,谢谢!




    试剂盒组分:
    ?
    Catalog#
    PD1611-02
    Preps
    10
    DNA Unit
    10
    Filter Unit
    10
    Replacement Cup
    10
    Buffer A1
    350 mL
    Buffer B1
    350 mL
    Buffer C1
    380 mL
    Buffer KB
    530 mL
    RNase A (20 mg/mL)
    35 mg(1.75 mL)
    Elution Buffer
    200 mL
    User Manual
    1
    ?
    保存条件:
    ?
    RNAse A在4℃下可?#21592;?#23384;一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它组?#36136;?#28201;保存。
    ?
    注意事项:
    1. 质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时,使用2倍的菌液体积,2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇,相同体积的Wash Buffer (70% 乙醇)和Elution Buffer.
    2. 转化菌:若为-70oC甘油冻存的菌,请先涂布平板培养后,再重新挑选新的单个菌落进?#20449;?#20859;。
    3. 柱结合能力:3 mg
    操作简明步骤:
    1. 取500 μL新鲜的菌液接种到 500 mL (勿超过 500 mL)的LB培养基(含适量抗生素),37oC震荡培养14-16小时。室温下5,000 x g离心10分钟,收集菌体,并尽可能的吸去上清。
    2. 加入30 mL Buffer A1(确保已加入RNase A),用移液器或涡流震荡确保细菌沉淀重新悬浮。
    3. 加入 30 mL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 ?#25105;?#28151;合均匀,然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。?
    4. 加入 36 mL Buffer C1,立即反转几次至出?#20013;踝窗咨?#27785;淀。涡漩震荡10 秒。充分混匀后,溶液将会变得颜色均一,如果此时溶液颜色不均一,均局部颜色过深,建议将溶液轻甩几次,以充分混?#20808;芤海?#23460;温下静置10分钟
    5. 层Filter unit与500ml或100ml的灭菌瓶(Corning# 430518 or 430282 or equivalent) 连接,旋紧,再将此装置与真空负压装置连接。
    6. 先将步骤“5”中底部较澄清的裂解产物用50 mL移液管转移至双层Filter unit中,静置5分钟后打开真空装置,使负压由低到高,5分钟后增至最大(0.04 Mpa)。
    7. 当大部分裂解液已被过滤时,关掉真空负压装置,等候1分种,拆卸装置,移去双层Filter unit。
    8. 再将DNA unit杯与一个新的灭菌的500ml或1000ml螺口标准瓶连接,旋紧。并将过滤嘴与真空负压装置连接。将步骤“7”中收集到的裂解液中加入36 ml 100%乙醇,立即混合均匀,立即将?#35805;?#20498;入DNA unit杯中,开启负压装置,进行过滤吸附操作。
    9. 再将剩下?#35805;?#20498;入DNA unit杯中,当所有裂解液已过滤完,再维持真空1分钟后,关掉负压装置。
    10. 在DNA Unit杯中加入50 mL Buffer KB,开启负压装置至最大(0.04Mpa)并维持1分钟,使Buffer KB完全通过DNA Unit杯。
    11. 在DNA Unit杯中加入50 mL 70%乙醇,开启负压装置至最大(0.04Mpa)并维持1分钟,使乙醇完全通过DNA Unit杯。重?#21019;?#25805;作步骤一次。
    12. 在DNA Unit杯中加入50 mL无水乙醇,开启最大负压维持1分钟,关掉负压装置,倒掉瓶子中的废?#28023;?#23558;DNA Unit杯重新连接至标准瓶上,开启负压装置至最大负压,真?#31896;?0分钟,以充分去除残留的乙醇。
    13. 关掉负压装置,静置一分钟,移去标准瓶,将DNA Unit 连接至一个新的50 mL的离心管中,并旋紧。
    14. 加入10 mL 灭菌 ddH2O或者Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上,室温放置2分钟,打开负压装置至最大(0.04 Mpa)洗脱DNA。此时会收集到3~5 mL洗脱?#28023;?#36825;是1st 洗脱液。
    15. 关掉负压装置,将DNA Unit连接至一个新的50mL的离心管中,加入5 mL 灭菌 ddH2O或者Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上,室温静置2分钟,开启负压装置至最大(0.04 Mpa)洗脱DNA。此时会收集到约3 mL洗脱?#28023;?#36825;是2nd洗脱液。
    操作流程:





    猜你喜欢
    云南11选5技巧
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>