• <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
    来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置首页>实验试剂制品>核酸纯化>质粒提取纯化> 无内毒素快速质粒超大量提取试剂盒(Mega 10)10preps

    商品编号:53891
    分享

    无内毒素快速质粒超大量提取试剂盒(Mega 10)10preps

    价    格:4680.00

    产    地:美国更新时间:2019/7/15 13:41:34

    品    牌:Biomiga型    号:PD1624-02

    状    态:正常点击量:828

    15068328216
    联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!

    上海妙骏生物科技有限公司

    联 系 人:言国英

    电     话:021-54461558

    传     真:021-54461657

    等     级: (第 10年)

    性     质:生产型,

    联系我时请说在来宝网上看到的,谢谢!




    试剂盒组分:
    ?
    Catalog? #
    PD1624-02
    Preps
    10
    DNA Unit
    10
    Filter Unit
    10
    Replacement Cup
    20
    Buffer A1
    2 ×530 mL
    Buffer B1
    2×530 mL
    Buffer N3
    350 mL
    Buffer KB
    530 mL
    Buffer RET
    5 ×440 mL
    RNase A (20 mg/mL)
    2 ×60 mg(4 ×1.5 mL)
    Endofree Elution Buffer
    270 mL
    User Manual
    1
    ?
    保存条件:
    ?
    RNAse A在4℃下可?#21592;?#23384;一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它组?#36136;?#28201;保存。
    ?
    注意事项:
    1. 质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时,使用2倍的菌液体积,2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇,相同体积的Wash Buffer (70% 乙醇)和Endofree Elution Buffer。
    2. 转化菌: 若为-70℃甘油冻存的菌,请先涂布平板培养后,再重新挑选新的单个菌落进?#20449;?#20859;。
    3. 切勿直接取冻存在4℃的菌进?#20449;?#20859;。
    4. 杯结合能力:10 mg
    操作简明步骤:
    1. 取500 μL新鲜的菌液接种到 1,200-1,500 mL (勿超过 500 mL)的LB培养基(含适量抗生素),37oC震荡培养14-16小时。室温下5,000 x g离心10分钟,收集菌体,并尽可能的吸去上清。
    2. 加入100 mL Buffer A1(确保已加入RNase A),用移液器或涡流震荡确保细菌沉淀重新悬浮。
    3. 加入 100 mL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 ?#25105;?#28151;合均匀,然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。?
    4. 加入30 ml Buffer N3, 立即反转几次至出?#20013;踝窗咨?#27785;淀。涡漩震荡10 秒。充分混匀后,溶液将会变的? 颜色均一,如果此时溶液颜色不均一,均局部颜色过深,建议将溶液轻甩几次,以充分混?#20808;芤海?
    5. 将双层Filter unit与500 mL或1000 mL的灭菌瓶(Corning# 430518 or? 430282 or equivalent) 连接,旋紧,再将此装置与真空负压装置连接。
    6. 先将步骤“5”中底部较澄清的裂解产物转移至双层Filter unit中,静置5分钟后打开真空装置,使负压由低到高,5分钟后增至最大(0.04 Mpa)
    7. 当大部分裂解液已被过滤时,关掉真空负压装置,等候1分种,拆卸装置,移去双层Filter unit。
    8. 再将DNA unit杯与一个新的灭菌的500 mL或1000 mL的灭菌螺口标准瓶连接,旋紧。并将过滤嘴与真空负压装置连接。在步骤“7”中收集到的裂解液中加入1倍体积的Buffer RET (如220 mLBuffer RET加入220 mL的上清液中), 120 mL100%乙醇,立即混合均匀,立即将?#35805;?#20498;入DNA unit杯中,开启负压装置,进行过滤吸附操作。
    9. 再将剩下?#35805;?#20498;入DNA unit杯中,当所有裂解液已过滤完,再维持真空1分钟后,关掉负压装置。
    10. 向DNA Unit杯中加入50 mL Buffer KB,最大负压(0.04Mpa)1分钟,使液体完全通过DNA Unit 杯。
    11. 在DNA Unit杯中加入50 mL 70%乙醇,最大负压(0.04Mpa)1分钟,使乙醇完全通过DNA Unit杯。重?#21019;?#25805;作步骤一次。
    12. 在DNA Unit杯中加入80 mL无水乙醇,最大负压1分钟,关掉负压装置,倒掉瓶子中的废?#28023;?#23558;DNA Unit杯重新连接至标准瓶上,开启负压装置至最大负压,真?#31896;?0分钟,以充分去除残留的乙醇。
    13. 关掉负压装置,静置一分钟,移去标准瓶,将DNA Unit 连接至一个新的50 mL的离心管中,并旋紧。
    14. 加入20 mL Endofree Elution Buffer 到DNA Unit杯的膜上,室温放置2分钟,打开负压装置至最大(0.04 Mpa)洗脱DNA。此时会收集到10~12 mL洗脱?#28023;?#36825;是1st 洗脱液。
    15. 关掉负压装置,将DNA Unit连接至一个新的50 mL的离心管中,加入5 mL Endofree Elution Buffer 到DNA Unit杯的膜上,室温静置2分钟,开启负压装置至最大(0.04 Mpa)洗脱DNA。此时会收集到约2~4 mL洗脱?#28023;?#36825;是2nd洗脱液。




    猜你喜欢
    云南11选5技巧
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
    广东时时彩开彩结果 哎30岁了好烦了天天想中彩票 内蒙古快三预测号 竟彩足球即时比分 辽宁35选7开奖直播现场 买冷号能中大奖吗 德州扑克培训大师 中国体彩网大乐透94期 内蒙古11选5走势图今天 118吉利心水论坛 黑龙江22选5大星走势图 双色球2019052 赌博专用表情包 江苏快三是国家彩票吗 山西11选5走势图和值