• <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
    来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    商品编号:73636
    分享

    abs9160 NP-40 Lysis Buffer

    价    格:360

    产    地:上海更新时间:

    品    牌:absin型    号:abs9160

    状    态:正常点击量:28

    17621920087
    联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!

    爱必信(上海)生物科技有限公司

    联 系 人:爱必信

    电     话:021-38015121/28

    传     真:021-38015121-8826

    等     级: (第 9年)

    性     质:生产型,服务型,

    联系我时请说在来宝网上看到的,谢谢!






    产品介绍

    概述
    描述

    NP-40,也称 Nonidet P-40(?#19968;交?#32858;乙二?#36857;?#26159;一种常见的非离?#26377;?#21435;垢剂。

    NP-40 裂解?#28023;∟P-40 Lysis Buffer)是一种比较温和的细胞组织裂解?#28023;?#20027;要成分为 50mM Tris-HC(l pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40 以及焦磷酸钠,正钒酸钠,氟化钠,EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂,可广谱且有效抑制蛋白降解,经本品裂解所得的蛋白样品,适用于常规的蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)等实验。经本品裂解收集的蛋白样品,可使用增强型 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂,不适合用 Bradford 法来测定总蛋白浓度。

    别名NP-40裂解液
    使用方法A培养的细胞样品
    1)充分融解 NP-40 裂解?#28023;?#20043;后混匀。取?#23454;?#37327;的裂解?#28023;?#20351;用前数分钟内加入 PMSF(Mw:174.2 g/mol),使其最终浓度为 1mM。
    2)贴壁细胞:吸除培养?#28023;?#29992; PBS、生理盐水或无血清培养?#21512;?#19968;遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可忽略此步)。按照六孔板的每孔细胞加入 150-250μl 裂解液的比例加量。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。裂解 15-30 分钟,通常裂解液接触细胞 1-3 秒后,细胞就会被裂解。
    悬浮细胞:离心收集细胞,用手指弹散细胞。按照六孔板的每孔细胞加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
    3)充分裂解后,10,000-14,000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、WB 和免疫沉淀等实验。
    【裂解液用量说明】?#21644;?#24120; 6 孔板每孔细胞加入 150μl 裂解液已经足够,如果细胞密度非常高可以?#23454;?#21152;大裂解液的用量到 200μl 或 250μl。
    B组织样品
    1)将组织剪切?#19978;?#23567;的碎片。
    2)充分融解 NP-40 裂解?#28023;?#20043;后混匀。取?#23454;?#37327;的裂解?#28023;?#20351;用前数分钟内加入 PMSF(Mw:174.2 g/mol),使其最终浓度为 1mM。
    3)按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加量。【注意:如果裂解不充分可以?#23454;?#28155;加用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可?#23454;苯?#20302;用量。】
    4)用玻璃匀浆器匀浆直至充分裂解,此过程尽量控制在 1-2 分钟内,以减少蛋白的降解。
    5)充分裂解后,10,000-14,000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、WB 和免疫沉淀等实验。
    6)如果组织样品本身非常细小,可以?#23454;?#21098;切后?#33519;?#21152;入裂解液裂解,通过高强度的?#37995;谢?#21248;器使样品裂解充分,之后同样离心取上清,用于后续实验。?#33519;?#35010;解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解的足够充分
    性能
    保存方法-20℃冻存




    猜你喜欢
    云南11选5技巧
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
  • <div id="y09gn"></div>
  • <li id="y09gn"></li>
    <dl id="y09gn"></dl>
    <div id="y09gn"><s id="y09gn"></s></div>
    临平特色餐馆 竟彩足球什么时候开奖结果 多乐彩任选7遗漏 35选7玩法 香港赛马会英语 重庆时时彩和值稳杀 广东快乐十分地址 10月25日湖北快3预测号 时时彩大小计划 云鼎娱乐场投注 14场胜负彩中奖 足彩网 在线电子游戏是什么 360彩票论坛 三张牌免费