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    商品编号:73317
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    AGS(STR鉴定)人胃腺癌细胞

    价    格:1500

    产    地:上海更新时间:

    品    牌:赛百慷型    号:AGS

    状    态:正常点击量:160

    15830017512
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    赛百慷上海生物技术股份有限公司

    联 系 人:赛百慷

    电     话:021-6157780

    传     真:

    等     级: (第 2年)

    性     质:1,

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    细胞特性

    1)?来源:胃癌

    2)?形态:上皮细胞样,贴壁生长

    3)?含量:>1x106 个/mL

    4)?污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

    5)?规格:T25瓶或者1mL冻存管包装



    产品参数

    1*10^6


    产品介绍

    细胞介绍

    细胞株源自一?#37995;?#32463;治疗的切除肿瘤碎块。

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    运输和保存

    可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

    (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

    (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

    (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。


    细胞用途:仅供科研使用。

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    细胞接受后的处理:

    1)?收到细胞后,请检查是否漏?#28023;?#22914;果漏?#28023;?#35831;拍照片发给我们。

    2)?请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

    3)?弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。

    4)?如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。

    5)?接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

    ?

    细胞培养步骤

    一.培养基及培养冻存条件准备:

    1)?准备F12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

    2)?培养条件: 气相:空气,95%?#27426;?#27687;化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3)?冻存?#28023;?0%血清,10%DMSO,现用现配。

    二.?细胞处理:

    1)?复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解?#24120;?#21152;入4mL培养基混合均?#21462;?#22312;1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清?#28023;?#34917;加1-2mL培养基后吹?#21462;?#28982;后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    2)?细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

    1.?弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.?加2ml消化?#28023;?.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    3.?按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清?#28023;?#34917;加1-2mL培养液后吹?#21462;?/p>

    4 . 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实?#26159;?#20917;按1:2到1:5的比例进?#23567;?/p>

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

    下面T25瓶为例;

    1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

    2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数?#30475;?#20110;1X106个细胞冻存。

    3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置?#21592;?#19979;?#25991;?#21462;。





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