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    现在位置首页>实验试剂制品>细胞株/菌种>细胞株> GES-1(STR鉴定)人胃黏膜上皮细胞

    商品编号:73319
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    GES-1(STR鉴定)人胃黏膜上皮细胞

    价    格:1500

    产    地:上海更新时间:

    品    牌:赛百慷型    号:GES-1

    状    态:正常点击量:133

    15830017512
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    赛百慷上海生物技术股份有限公司

    联 系 人:赛百慷

    电     话:021-6157780

    传     真:

    等     级: (第 2年)

    性     质:1,

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    细胞特性

    1)?来源:胃

    2)?形态:上皮样,贴壁细胞

    3)?含量:>1x106 个/mL

    4)?污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

    5)?规格:T25瓶或者1mL冻存管包装



    产品参数

    1*10^6


    产品介绍

    细胞描述

    该细胞是从9个月的胎儿胃上皮细胞中培养分离出来,经过SV40病毒转染后,筛选获得。不能在裸鼠中成瘤,是在研究人胃肿瘤过程中一种重要的模式系统。

    细胞特性

    1)?来源:胃

    2)?形态:上皮样,贴壁细胞

    3)?含量:>1x106 个/mL

    4)?污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

    5)?规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

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    运输和保存

    可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

    (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

    (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

    (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

    ?

    细胞用途:仅供科研使用。

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    细胞接收后的处理:

    1)?收到细胞后,请检查是否漏?#28023;?#22914;果漏?#28023;?#35831;拍照片发给我们。

    2)?请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

    3)?将T25瓶中的细胞培养基离心后,去上清,添加6ml完全培养基,加入新的T25瓶中继续培养。

    4) 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.

    ?

    细胞培养步骤

    一.培养基及培养冻存条件准备:

    1)?准备DMEM培养基;北美胎牛血清,10%;2 mM glutamine(谷氨酰胺);1 mM pyruvate(bing酮酸盐);?50 μM 2-mercaptoethanol(巯基乙醇);双抗,1%。

    2)?培养条件: 气相:空气,95%?#27426;?#27687;化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3)?冻存细胞:冻存细胞时,用FBS重悬细胞,然后加入一定量的DMSO,轻轻混合均匀后移入到冻存管中,DMSO终浓度为10%。

    二.?细胞处理:

    1)?复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解?#24120;?#31163;心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清?#28023;?#34917;加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。

    2)?细胞传代:如果细胞密度达80%,即可进行传代培养。

    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

    1.?弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.?加2ml消化?#28023;?.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml此细胞的培养基终止消化。

    3.?轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清?#28023;?#21152;入1mL培养液后吹匀。

    4 . 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实?#26159;?#20917;按1:2到1:4的比例进?#23567;?/p>

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

    下面T25瓶为类;

    1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1-2ml胰酶(含EDTA),细胞变圆脱落后,加入2-3ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

    2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和等体积的冻存?#28023;?#36731;轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬?#28023;?#27880;意冻存管做好标识。

    3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置?#21592;?#19979;?#25991;?#21462;。





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